Object
Title: Zastosowanie ilościowej PCR (RQ-PCR) w monitorowaniu choroby resztkowej u chorych na przewlekłą białaczkę szpikową
Abstract:
U chorych na przewlekłą białaczkę szpikową - CML (Chronic Myeloid Leukemia) występuje charakterystyczna anomalia chromosomowa w komórkach macierzystych układu hematopoetycznego: tzw. chromosom Philadelphia (Ph). Powstaje on w wyniku wzajemnej translokacji pomiędzy długimi ramionami chromosomu 9 oraz 22. Molekularnym odpowiednikiem chromosomu Ph jest gen fuzyjny BCR-ABL. Jego podwyższona ekspresja prowadzi do niekontrolowanej proliferacji komórek hematopoetycznych oraz zahamowania procesu apoptozy i różnicowania. Obecność chromosomu Ph można stwierdzić kilkoma metodami m.in. cytogenetyka klasyczna, FISH (Fluorescence In situ Hybridization) oraz RT-PCR (Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction). Jedną z technik biologii molekularnej wykorzystywanych w diagnostyce CML jest również metoda RQ-PCR (Real-time Quantitative PCR - polimerazowa reakcja łańcuchowa w czasie rzeczywistym). Pozwala ona niezwykle precyzyjnie określić poziom ekspresji genu, a ze względu na zastosowanie sondy molekularnej, metodę tę cechuje bardzo wysoka specyficzność i czułość. Pozwala ona na sprawne monitorowanie postępów leczenia i choroby resztkowej m.in. w grupie chorych cierpiących na przewlekłą białaczkę szpikową. Wzrost ekspresji genu BCR-ABL stwierdzony tą techniką, pozwala na wykrycie nawrotu choroby na wiele miesięcy przed pełnoobjawową wznową białaczki i modyfikację leczenia. Możliwość śledzen ; ia zmian ilości transkryptu na poziomie genomu w trakcie leczenia CML, ma więc ogromne znaczenie prognostyczne. Do grupy badanej zakwalifikowano 60 pacjentów Kliniki Hematologii CMUJ w Krakowie chorych na CML. Ekspresję genu BCR-ABL mierzono średnio co trzy miesiące. W wyniku analiz przeprowadzonych testem RQ-PCR u większości pacjentów zaobserwowano stopniowy wyraźny spadek poziomu transkryptu BCR-ABL w trakcie terapii Imatinibem. U części chorych spośród badanej grupy poziom transkryptu utrzymywał się na stałym poziomie, natomiast u niektórych pacjentów mimo podawania leku, poziom badanego genu wzrastał. Czułość testów RQ-PCR wynosiła 10-4 – 10-5. Analizę RQ-PCR przeprowadzano na aparacie ABIPRISM 7700 przy użyciu technologii TaqMan. Jako kontrolę pozytywną zastosowano rozcieńczenia plazmidu. Wahania krzywych obrazujących przebieg transkryptu w czasie leczenia, wyrażony stosunkiem liczby kopii transkryptu BCR-ABL do liczby kopii genu ABL, w sposób istotny korelowały z obrazem klinicznym u badanych chorych. U pacjentów, u których zaobserwowano stopniowy spadek transkryptu w teście RQ-PCR wystąpiła całkowita remisja hematologiczna oraz remisja cytogenetyczna. U pacjentów, u których nie zaobserwowano spadku transkryptu lecz jego stałe utrzymywanie się na podobnym wysokim poziomie doszło do progresji choroby do kryzy blastycznej. Technika RQ-PCR jest bardzo dobrą metodą służącą mo ; nitorowaniu poziomu transkryptu BCR-ABL. Jest ona także czułą i niezawodną metodą odpowiednią do monitorowania choroby resztkowej u pacjentów chorych na CML leczonych Imatinibem i innymi inhibitorami kinaz tyrozynowych.
Place of publishing:
Level of degree:
Degree discipline:
Degree grantor:
Promoter:
Date issued:
Identifier:
Call number:
Language:
Access rights:
Object collections:
Last modified:
Jun 26, 2023
In our library since:
Nov 21, 2012
Number of object content hits:
1 420
Number of object content views in PDF format
161
All available object's versions:
http://dl.cm-uj.krakow.pl:8080/publication/973
Show description in RDF format:
Show description in OAI-PMH format:
| Edition name | Date |
|---|---|
| ZB-107305 | Jun 26, 2023 |
Objects
Similar
Zawada, Magdalena
Czekalska, Sylwia
Foryciarz, Kajetana
Gibek, Katarzyna
Nowakowska-Kopera, Alicja
Pawińska-Wąsikowska, Katarzyna
Krawczyk, Katarzyna
Książek, Teofila
