Głównym celem badań było wykazanie udziału monocytów w fenomenie apoptozy komórek śródbłonka naczyniowego HUVEC in vitro. Cel ten miał być osiągnięty poprzez ocenę wpływu monocytów na ekspresję mRNA i białek: PUMA oraz HSP27 i HSP70 w komórkach HUVEC; wykazanie translokacji jądrowej białka AIF, identyfikację pęknięć DNA oraz obecność produktów enzymów wykonawczych (PARP) w komórkach śródbłonkowych eksponowanych na monocyty. Dodatkowo - oznaczenie wpływu cytokin prozapalnych IL-1[beta], IL-6, MCP-1 i TNF-[alfa] na poziom białek PUMA, HSP70, HSP27 w komórkach HUVEC. Modelem komórek śródbłonkowych były komórki HUVEC. Model monocytów stanowiła linia MonoMac6 oraz monocyty wyizolowane z krwi obwodowej. Zastosowano dwa typy hodowli mieszanych: bezpośrednie i insertowe. Po 24 h i 48 h eksperymentu monocyty usuwano, a z komórek śródbłonka naczyniowego izolowano RNA, białka cytoplazmatyczne i jądrowe, bądź poddawano je procedurze umożliwiającej wykrycie komórek apoptotycznych. W niniejszej pracy wykazano, że monocyty nie prowadzą do apoptozy komórek śródbłonka naczyniowego, mimo iż powodują wzrost poziomu białka PUMA. Z badań wynika, iż rolę protekcyjną może pełnić tu głównie białko HSP27 (i jego forma p-HSP27) i HSP70, których ekspresja znacząco wzrasta. Ponieważ w komórkach śródbłonkowych stymulowanych cytokinami prozapalnymi poczyniono podobną obserwację, uprawnionym wydaje się stwie ; rdzenie, że w komórkach HUVEC ma miejsce mechanizm kompleksowy: z jednej strony aktywowana jest kaskada apoptotyczna, a z drugiej system białek stresu komórkowego mających za zadanie utrzymać homeostazę komórkową.
Jul 5, 2022
Nov 21, 2012
20
0
http://dl.cm-uj.krakow.pl:8080/publication/961
Edition name | Date |
---|---|
ZB-107181 | Jul 5, 2022 |
Targosz, Aneta
Stec, Małgorzata
Kaczmarczyk, Grzegorz
Abdel-Kader, Rania.
Ostrowska, Barbara
Krzykowska-Petitjean, Katarzyna