@misc{Trzyna_Elżbieta_Optymalizacja_2005, author={Trzyna, Elżbieta}, address={Kraków}, howpublished={online}, year={2005}, school={Wydział Lekarski}, language={pol}, abstract={U pacjentów poddanych allogenicznym przeszczepieniom komórek krwiotwórczych dochodzi do wytworzenia stanu chimeryzmu, polegającego na współistnieniu w jednym organizmie komórek dawcy i biorcy. Dotychczas me istnieje ujednolicony protokół analizy detekcji chimeryzmu komórek hematopoetycznych po przeszczepieniu i każdy z ośrodków bada chimeryzm za pomocą metody dogodnej dla danego ośrodka. Celem rozprawy było opracowanie i wdrożenie optymalnej metody oznaczania chimeryzmu u pacjentów poddanych przeszczepieniem krwiotwórczym w Ośrodku Transplantacji USD CMUJ. W pracy porównywano przydatność różnych frakcji komórek krwi obwodowej jako materiału do badania chimeryzmu, różne metody ich pozyskiwania, różne metody izolacji DNA oraz różne metody oceny samego chimeryzmu. Na podstawie przeprowadzonych badań, stwierdzono, że optymalną frakcją krwi obwodowej do izolacji DNA, są leukocyty pozyskane w wyniku lizy krwi roztworem chlorku amonu. Optymalnym sposobem izolacji DNA okazało się wykorzystanie zestawu firmy Qiagen. Ponadto stwierdzono, że najbardziej czułą metodą monitorowania chimeryzmu jest PCR w czasie rzeczywistym, jednakże ze względów praktycznych i ekonomicznych za optymalną metodę uznano amplifikację sekwencji STR i analizę produktów za pomocą elektroforezy kapilarnej. Metoda ta została wdrożona w naszym Ośrodku.}, title={Optymalizacja badania chimeryzmu hematopoetycznego na modelu doświadczalnym}, type={Praca doktorska}, keywords={chimeryzm, FISH, STR, PCR, PCR w czasie rzeczywistym}, }