Search for: [Abstract = "Receptory aktywowane przez proliferatory peroksysomów \(PPAR\) należą do nadrodziny receptorów jądrowych będących zarazem czynnikami transkrypcyjnymi, regulującymi ekspresję genów poprzez oddziaływanie bezpośrednio z DNA. Obecnie znane są trzy rodzaje receptorów PPAR\: PPAR, PPARδ\/β i PPARγ. Mimo dużego podobieństwa w budowie białka, pewne różnice sekwencji aminokwasów sprawiają, że ligandy wiążą się z różnym powinowactwem do poszczególnych typów receptorów, niektóre zaś wiążą się specyficznie tylko do jednego z nich. Spośród syntetycznych ligandów receptorów jądrowych, swoistymi, silnymi agonistami dla PPAR są fibraty. Są one lekami obniżającymi stężenie triglicerydów w osoczu, oraz korygującymi poziom lipoprotein. Należy tu m.in. fenofibrat. Dla PPARδ\/β selektywne ligandy to m.in. L\-165041, GW\-501516 i karbacyklina. Syntetyczne ligandy dla PPARγ to leki zwiększające wrażliwość tkanek na insulinę, z grupy tiazolidinedionów \(glitazony\) np. ciglitazon. Zmniejszają one poziom glukozy w osoczu u człowieka, a także zmniejszają ilość krążących wolnych kwasów tłuszczowych. W ostatnich latach pojawiło się wiele interesujących doniesień o antynowotworowej funkcji ligandów receptorów PPAR. Czerniak jest nadal jednym z nowotworów, nie w pełni scharakteryzowanych na poziomie molekularnym. Z dotychczas opublikowanych doniesień wynika, że zmiany poziomu i aktywności czynników transkrypcyjnych\: MITF, NFkB, AP\-1, Notch, CREB, Ets\-1, β\-katenina\/LEF\/TCF, STAT, RAR i RXR pełnią istotną rolę w rozwoju czerniaka. Wymienione czynniki transkrypcyjne wpływają na zdolność komórek do proliferacji, potencjał migracyjny i tworzenie przerzutów. Receptory retinoidów, RAR i RXR, są koreceptorami czynników transkrypcyjnych PPAR. W przeciwieństwie do receptorów retinoidów, które są dość dobrze scharakteryzowane w literaturze, zarówno w skórze, melanocytach jak i w czerniaku, rola receptorów jądrowych PPAR w progresji czerniaka jest poznana w znacznie mniejszym stopniu, a wyniki opublikowanych prac są często sprzeczne. Celem pracy było wyjaśnienie czy ligandy receptorów PPAR wpływają na procesy proliferacji, apoptozy i ekspresję wybranych białek, istotnych w progresji czerniaka złośliwego, jego migracji i angiogenezie. W ramach weryfikacji założonej hipotezy o antynowotworowym działaniu receptorów PPAR, sprawdzono ekspresję mRNA i białka dla trzech receptorów PPAR α, β\/δ, γ w liniach komórkowych czerniaka, pochodzących z różnych stadiów rozwojowych\: analizowano wpływ badanych ligandów na aktywność transkrypcyjną PPAR i zdolność wiązania się aktywnych czynników do sekwencji odpowiedzi na receptor PPAR, tzw. PPRE. Zbadano ponadto wpływ syntetycznych ligandów poszczególnych receptorów PPAR na procesy proliferacji komórek czerniaka oraz ekspresję białek regulujących cykl komórkowy, takich jak\: p21, cyklina D1, c\-Myc, NFkB. Sprawdzono także, wpływ ligandów PPAR na wydzielanie białek istotnych z punktu widzenia wzrostu potencjału nowotworowego\: VEGF, MMP\-2 i 9, MIA. Przebadano również potencjał ligandów PPAR do indukcji procesu programowanej śmierci komórki \- apoptozy. Materiał do badań stanowiły cztery linie komórkowe pochodzące z różnych stadiów rozwojowych czerniaka\: WM35 \- z ogniska pierwotnego o poziomej fazie wzrostu \(RGP\), WM9 \- z ogniska przerzutowego do węzłów chłonnych, WM239A \- z ogniska przerzutowego do skóry i A375P \- z litego guza złośliwego z płuc. Badania realizowano posługując się powszechnie uznanymi technikami analitycznymi w tym metodami biochemii klasycznej \(spektrofotometria, spektrofluorymetria, techniki wirowania, elektroforeza białek w warunkach natywnych i w denaturujących, elektroforeza DNA, zymografia, western\-blot, chromatografia\), biologii komórki \(hodowle komórkowe w monowarstwie in vitro, techniki barwienia i analiz mikroskopowych\) i biologii molekularnej \(izolacja RNA i DNA, RT\-PCR, elektroforeza produktów PCR, lipotransfekcje komórek z użyciem specyficznych wektorów, badania aktywności transkrypcyjnej, testy opóźniania w żelu\)."]

Number of results: 0